Ultrasonik hujayra maydalagich yordamida hujayra bo'linishi orqali xlorofilni olishning o'ziga xos bosqichlari
Feb 20, 2024
Ultrasonik hujayra maydalagich suyuqlikdagi ultratovushning dispersiya ta'siridan kavitatsiya hosil qilish uchun foydalanadi va shu bilan suyuqlikdagi qattiq zarrachalar yoki hujayra to'qimalarini buzadi.
Biologik sanoatning rivojlanishi namunalar haroratini o'lchash va nazorat qilish, past haroratli sovutish namunalari va butun mashinaning razvedka darajasini yaxshilash kabi ultratovushli hujayra pulverizatorlari yordamida tajribalar uchun talablarni oshirdi.
Ultrasonik hujayra maydalagich yordamida ultratovushli hujayralarni maydalash orqali xlorofillni olishning aniq bosqichlari:
1. Suv namunasini santrifüj qiling yoki filtrlang va assimilyatsiya filtriga asetat tolasi filtri membranasini o'rnating. Filtrlash uchun suv namunasining miqdoriy hajmini to'kib tashlang va filtrlash paytida salbiy bosim juda yuqori bo'lmasligi kerak (taxminan 50 kPa). Suv namunasi olingandan keyin filtr membranasidagi namlikni kamaytirish uchun 1-2 daqiqa chizishni davom ettiring. Agar qisqa muddatli saqlash uchun 1-2 kun talab qilinsa, uni muzlatish uchun oddiy muzlatgichda saqlash mumkin. Agar uzoq muddatli saqlash kerak bo'lsa (30 kun), uni past haroratli muzlatgichda (-20 daraja) saqlash kerak.
2. Tarkibida fitoplankton boʻlgan filtr pardasini chiqarib oling va uni past haroratda muzlatgichda 6-8 soat davomida quriting. Uni qaychi bilan mayda bo'laklarga kesib oling va uni 5 ml yoki 10 ml santrifüj naychasiga joylashtiring. Bo'laklarni suyuqlik darajasidan pastga tushirish uchun 3-4 ml 90% aseton qo'shing. Parchalarni ultratovushli idishga joylashtiring va namunaning hujayralarini sindirish uchun ultratovush to'lqinlaridan foydalaning. (Birlashtirilgan usullar uchun * parchalanish vaqti va chastotasini aniqlashni osonlashtirish uchun turli vaqt va chastotalardagi tajribalarni solishtirish).
3. Hujayra parchalanishiga duchor bo'lgan namunani 10 daqiqa davomida sentrifuga (3000-4000r/min) yordamida ultratovush yordamida santrifüj qiling. Supernatantni 5 ml yoki 10 ml o'lchov kolbasiga quying. 90% aseton bilan 5 ml yoki 10 ml ga suyultiriladi va yaxshilab silkitiladi.
4. Supernatantni spektrofotometrga qo'ying va mos ravishda 750nm, 663nm, 645nm va 630nm to'lqin uzunligidagi absorbans qiymatlarini o'qish uchun 1 sm optik yo'l kolorimetrik idishdan foydalaning. Namuna absorbsiyasini tuzatish uchun bo'sh absorbans o'lchovi sifatida 90% asetondan foydalaning.
